Endringer i serumnivåer av kobalamin- og kobalaminanaloger

20.05.2021

Scand J Haematol (l980) 25 , 401406

Endringer i serumnivåer av kobalamin- og kobalaminanaloger

i

¹Medisinsk laboratorium og ²Departementet for hematologi, City Hospital, Nottingham, England

Den nylige introduksjonen av radioanalyser for 'ekte' kobalamin, i motsetning til kobalamin og dets

analoger, har resultert i at signifikant lavere nivåer av kobalamin er funnet hos pasienter med

folatmangel.

I studien av 81 pasienter ble det funnet at kobalaminanalognivåene økte og kobalamin til

reduseres etter hvert som røde blodlegemer reduseres. Studier av absorpsjon av kobalamin hos 15 pasienter med lave

nivåer av kobalamin og folat ble funnet å være normale hos 10 pasienter, som alle demonstrerte

høye nivåer av analoger i forhold til ekte kobalamin. Vi har funnet at den gjennomsnittlige serum

kobalamin økte fra 210 ng / l (område 1W380) til 309 (150-470) og analoger falt fra

226 ng / l (150-280) til 127 (65-190) hos pasienter med 1 folatmangel når de ble behandlet med folsyre.

Det ser ut til at kobalaminanaloge konsentrasjoner øker i folatmangel, og det

hos disse pasientene kan behandling med folkesyre alene korrigere både lavkobalamin og

høye analoge nivåer.

👉🏼Reduserte serumkobalaminnivåer hos pasienter med folatmangel har vært anerkjent i mange år. Graden av slik reduksjon er vanligvis moderat, og i noen tilfeller kan nivået vises å gå tilbake til det normale bare ved behandling med folsyre (Raven et al 1972).

Mange laboratorier bruke en radioisotop fortynningsmetode for den estimering av serum-cobalamin. Bevis for tilstedeværelsen av kobalaminanaloger i humant plasma (Kolhouse et al 1978, Cooper & Whitehead 1978) har ført til en endring i bindingsproteinet som brukes i mange analyseprosedyrer. Den bruk av en ren intrinsisk faktor fremstillingen i stedet for en forurenset med R-proteinet er aktivert cobalamin som skal estimeres med liten interferens fra cobalamin-analoger. Når den måles på denne måten blir den tidligere observerte reduksjonen av serumkobalamin hos folatmangel forsøkspersoner mer slående.

I 81 pasienter med en rekke av rødecelle folatenivåer har vi studert forholdet av serum- cobalamin og serum- cobalamin-analoger til rødcelle folat i rekkefølge for å fastslå hvorvidt det nivå av analoger kunne være nyttig i å skille de i hvilke den lave serum-cobalamin er sekundær til folatmangel.

Kobalaminabsorpsjon har blitt studert hos 15 pasienter med lave serumkobalaminer og subnormale røde blodlegemer. I 10 pasienter med folatmangel vi har målt serum-cobalamin analoger før og under folat terapi.

MATERIALER OG METODER

Blodprøver ble valgt tilfeldig fra de som ble sendt inn for kobalamin- og folatanalyser. 81 pasienter med et utvalg av lidelser var representert. Serum kobalaminer, serum folater og røde celle folater ble estimert i en samtidig analyse system modifisert i forhold til det som er beskrevet ved Gutcho & Mansbach (1977). Hele blodprøver for rød cellefolat estimering ble fortynnet 1:10 i 10 g / l askorbin- syreoppløsning og inkuberes ved 20 ° C i 60 minutter før analyse. Det anvendte preparatet for egenfaktor (Armor Pharmaceutical Co. Ltd., Eastbourne, Sussex, Storbritannia) ble funnet å inneholde 24% egenfaktor og 76% R-proteinaktivitet basert på den prosentvise hemming av kobalaminbinding forårsaket av et stort overskudd av kobinamid ( Ikke- iboende faktorblokkeringsmiddel, Becton Dickinson Immunodiagnostics, Wembley, Middlesex, Storbritannia). I analysesystem for 'sann' kobalaminer de R-proteinene ble blokkert ved tilsetning av kobinamid (Akerkar et al 1979), mens i system for estimering av det totale kobalaminer pluss analoger ingen kobinamid ble tilsatt, og fortynning av den bindende protein vesen riktig justert. Andre forhold var ellers identiske i begge. Cobalamin-analoge nivåer ble oppnådd ved å trekke den sanne kobalamin-figuren fra den som ble oppnådd i analysen av totale kobalamin pluss analoger. I forbindelse med denne studien ble det akseptert at bruken av et 76% R-proteinpreparat i stedet for 100% R-protein kan gi en liten undervurdering av den faktiske analoge figuren.

Dicopac test kits ble innhentet fra den Radiochemical Centre (Amersham, Buckinghamshire, UK) og kobalamin absorpsjon tester utført på 15 pasienter som hadde tidligere blitt vist å ha vernepleier kobalamin og røde celle folatnivåer.Disse pasienter ble behandlet med farmakologiske doser av folsyre i 14 uker før for å studere, med eller uten kobalamin injeksjoner. Endringer i kobalamin- og kobalaminanaloger før og under erstatningsterapi ble studert hos ytterligere 10 pasienter med folatmangel.

RESULTATER

Totale kobalaminer pluss analoger viser bare en liten tendens til å falle med synkende folatnivåer, figur 1, mens 'ekte' kobalamin viser et mer signifikant fall i forhold til rød cellefolat, figur 2. Kobalaminanaloger er vist å øke med synkende folatnivå, Figur 3. Innen pasientgruppen som viste subnormale røde blodlegemer (dvs. mindre enn 130 pg / 1), kunne to grupper identifiseres. Mens begge grupper viste kobalamin nivåer av mindre enn 180 ng / l, en gruppe (A) bestående av 7 pasienter viste betydelig høyere kobalamin analoge nivåer sammenliknet med den andre gruppe (B), som besto av 3 pasienter. Gruppe (A) pasientene viste alle analoge nivåer som var større enn den sanne kobalaminkonsentrasjonen , mens i gruppe (B) var analogene mindre enn 65% av den sanne kobalamintallet.

Av de 15 pasientene som ble studert med Dicopac-testen, falt 10 pasienter i gruppe (A) og 5 i gruppe (B). Gruppen (A) pasienter som alle viste en normal kobalamin absorpsjon mønster. 4 av pasientene fra gruppe (B) viste absorpsjonsmønstre som er karakteristiske for pernisiøs anemi, og den femte viste et uspesifikt malabsorpsjonsbilde .

De folatmangel pasienter behandlet med folsyre syre alene i perioder som varierer fra 3-65 d viste en økning i gjennomsnittlig kobalamin nivåer fra 210 ng / l (område 100-380) til 309 ng / l (område 150-470) og en reduksjon i gjennomsnittlig kobalaminanalogkonsentrasjon fra 226 ng / l (område 150-280) til 127 ng / l (område 65-190, figur 4).

DISKUSJON

Resultatene tyder på et betydelig fall i serum kobalamin og en samtidig økning i kobalamin analoger med folat mangel. Begge disse endringene er reversible ved behandling med folsyre alene.

I folat -manglende individer Raven et al (1972) observerte forholdsvis høye nivåer av kobalamin som bestemt ved radioisotopisk i motsetning til mikrobiologiske teknikker. Vårt funn av en økning i kobalaminanaloger i folatmangel bidrar til å forklare dette avviket.

Den mekanisme av disse endringene er uklar. Fallet i kobalamin kan skyldes malabsorpsjon eller forstyrret metabolisme eller en kombinasjon av de to. Folatmangel kan resultere i en reduksjon av sirkulerende methylcobalamin (Linnell 1975), hovedformen av cobalaminet i serum (Linnell et al 1969). Som 5-metyltetrahydrofolat er involvert i metyleringen av cob (1) Alamin en mangel av folat kan resultere i redusert methylcobalamin syntese. Deoksyadenosylkobalamin ville antagelig ikke bli påvirket, da folat ikke er kjent for å være involvert i produksjonen, og folatmangel ikke forårsaker økt utskillelse av metylmalonsyre (Chanarin et al 1973).

Økningen i kobalamin analoger utgjør en rekke av spørsmål. Er sant kobalamin endret til en analog form som ikke binder til egen faktor, eller påvirker folatmangel klaring av analoger fra sirkulasjonen for å øke konsentrasjonen i serum? Den sannsynlige forklaringen i vårt syn er at kobalamin -analoger blir syntetisert i vev, muligens som et resultat av forstyrret metylering av cob (1) Alamin forårsaket av lave nivåer folat. Alternativet syn er at over forsinket klaring fra plasma. Cobalamin -analoger blir normalt fjernet fra den sirkulasjonen festet til en plasma R-protein, transkobalamin 111 (Allen 1976). Klarering skjer via leveren og er ikke kjent for å være folatavhengig.

Uansett årsak til økte kobalaminanaloger i folatmangel, kan det påvises at de faller som et resultat av folatbehandling mens de sanne kobalaminer øker. Kobalamin absorpsjon studier tyder på at til tross for den funn av lav serum kobalamin nivåer det er ingen tegn på malabsorpsjon etter folat behandling.

Det er derfor synes sannsynlig at i disse pasienter med lavt serum-cobalamin, lave rød celle folater og øket cobalamin analoger behandling med folsyre alene er effektiv i å øke serum-cobalamin.

REFERANSER

Akerkar A, Weaver D, Levesanos N, Biehl K & Block E (1979) Samtidig analyse for folat og ekte kobalamin eller total vitamin BQ. Cfin Chem 25, 1136.

Allen RH (1976) Kommentar - plasmatransport av vitamin Bl2. BrJ Huematol33, 161-71.

Chanarin I, England JM, Mollin C & Perry J (1973) Metylmalonsyreutskillelsesstudier. Br J Haematol 25, 45-53.

Cooper BA & Whitehead VM (1978) Bevis for at noen pasienter med pernisiøs anemi ikke gjenkjennes ved radiofortynningsanalyse i serum. N Engl J Med 299, 816-18.

Gutcho S & Mansbach L (1977) Samtidig radioanalyse av vitamin B12 og folsyre i serum. Clin Chem 23, 1609-14.

Kolhouse JF, Kondo H, Allen NC, Podell E & Allen RH (1978) cobalamin- analoger er til stede i humant plasma , og kan maskere cobalamin-mangel fordi strømmen radioisotop fortynning analysene er ikke spesifikk for sann cobalamin. N Engl J Med 299, 785-92.

KELVYN SHEPPARD & DAVID RYRIE

Linnell JC, Mackenzie HM, Wilson J & Matthews DM (1969) Mønstre av plasmakobalaminer hos kontrollpersoner og i tilfeller av vitamin B12- mangel. J CIin Pathol 22, 545-50.

Linnell JC (1975) Kobalarnins skjebne in vivo. I BM Babior (red) Cobalumin: biokjemi og patofysiologi, s 287-333. John Wiley, New York.

Raven JL, Robson MB, Morgan J 0 & Hoffbrand AV (1972) Sammenligning av tre metoder for måling av vitamin B12 i serum: radioisotopisk, Euglena gracilis og Lactobacillus leichmanii. Br J Haematol 22, 21-31.