B12-verdier hos barn

Vitamin B12-mangel hos barn kan være assosiert med (alvorlige) nevrologiske manifestasjoner, derfor er anerkjennelse viktig. Det er utfordrende å diagnostisere vitamin B12-mangel hos barn.

Aldersavhengighet av plasma-vitamin B12-statusmarkører hos nederlandske barn og ungdom

    Abstrakt

    Bakgrunn

    Vitamin B12-mangel hos barn kan være assosiert med (alvorlige) nevrologiske manifestasjoner, derfor er anerkjennelse viktig. Det er utfordrende å diagnostisere vitamin B12-mangel hos barn. Denne studien tok sikte på å undersøke plasmametylmalonsyre, holotranskobalamin og totalt kobalamin hos barn 0-18 år og å estimere aldersavhengige referanseintervaller.

    Metoder

    Plasma-vitamin B12-markører ble målt i samlet plasmaprøver på 170 barn 0-18 år som besøkte et lokalt primærhelsetjenestelaboratorium. Alle hadde hemoglobin- og MCV-verdier innen referanse. Pediatrisk plasma B12-biomarkører ble målt og referanseverdier ble avledet derav.

    Resultater

    Plasma metylmalonsyre var høyere hos små barn, spesielt mellom 1 og 6 måneder; totalt kobalamin og holotranskobalamin var høyest fra 0,5 til 4 år og falt til 10 år. Holotranskobalamin i plasma var sterkt korrelert med plasma totalt kobalamin; forholdet var uavhengig av alder. Plasmametylmalonsyre var litt mer relatert til totalt kobalamin enn holotranskobalamin. 

    👉🏼En stor andel av hovedsakelig små barn vil bli feilklassifisert når referanser for voksne brukes.

    Konklusjoner

    👉🏼 Pediatriske referanseverdier for kobalaminmarkører er nødvendige for å muliggjøre tidlig gjenkjenning og overvåking av barn mistenkt for (klinisk) kobalaminmangel.


    innvirkning

    • Vi analyserte tre vitamin B12-plasmamarkører i plasma, dvs. total kobalamin, holotranskobalamin og metylmalonsyre, i plasma på 170 barn 0-18 år og var i stand til å utlede referanseintervaller derav.

      👉🏼 Anerkjennelse av vitamin B12-mangel hos barn er viktig, men utfordrende, da pediatriske referanseintervaller for plasma-vitamin B12-statusmarkører, spesielt plasma-holotranscobalamin, ikke er godt beskrevet. Vi tror at resultatene våre kan hjelpe tidlig anerkjennelse og overvåking av barn som mistenkes for (klinisk) vitamin B12-mangel.

    Introduksjon

    Vitamin B12 (cobalamin (Cbl)) er et uunnværlig vannløselig vitamin som fungerer som kofaktor for de to enzymene metylmalonyl-CoA mutase og metioninsyntase.

     👉🏼Cbl er viktig, for eksempel for cellevekst og utvikling av sentralnervesystemet. 1 , 2 , 3 Cbl-mangel ser ut til å forekomme hyppig hos små barn, spesielt hos de som er født til mødre med lav Cbl-status hos mødre. 3 Tidlig anerkjennelse og behandling av Cbl-mangel er viktig for å forhindre irreversibel nevrologisk skade. Hos barn kan irritabilitet, hypotoni, utviklingsforsinkelse, manglende trives, tretthet og motoriske forstyrrelser være fremtredende og livstruende. 4 , 5 , 6 ,7 Diagnostisering av Cbl-mangel er imidlertid fortsatt utfordrende. For det første er kliniske symptomer på Cbl-mangel ikke-spesifikke. Klassiske symptomer inkluderer tretthet og (megaloblastisk) anemi. 

    👉🏼Men både hos voksne og barn kan nevrologiske symptomer (dvs. motoriske, sensoriske og kognitive svikt, humørsvingninger, unormal balanse og reflekser, hukommelsestap og psykose) og tretthet oppstå før anemi utvikler seg og til og med kan eksistere uten hematologiske symptomer. . 1 , 8

     For det andre er det ingen gullstandard for vurdering av Cbl-mangel. 1 , 8 , 9En vanlig anvendt biomarkør er plasmakonsentrasjon av Cbl, som representerer Cbl bundet til transportproteinene, dvs. haptokorrin (HC; ~ 80%) og transkobalamin (TC; ~ 20%). 

    Totale Cbl-konsentrasjoner påvirkes imidlertid av andre faktorer enn Cbl-status, inkludert HC-mangel og betennelse / infeksjon, 8 , 9 , 10 , 11 som kompliserer dens diagnostiske verdi. En mer nylig introdusert markør, dvs. holotranscobalamin (holoTC), representerer brøkdelen av sirkulerende Cbl bare bundet til TC.

    Denne fraksjonen tas opp av celler og blir derfor referert til som aktiv B12. Dens diagnostisk verdi er lovende, 3 men data hos barn er knappe. 12 , 13 , 14 Plasmametylmalonsyre (MMA) og total plasmahomocystein er såkalte funksjonelle markører, som gjenspeiler mengden intracellulær Cbl tilgjengelig for de to kjente Cbl-avhengige enzymene i henholdsvis humant, dvs. metylmalonyl-CoA mutase og metioninsyntase. Konsentrasjonen deres øker når utilstrekkelig Cbl er tilgjengelig. 

    👉🏼En forhøyet total plasma-homocystein-konsentrasjon er mindre spesifikk enn plasma-MMA for diagnostisering av Cbl-mangel, da den også er avhengig av f.eks. Tilstrekkelig folat og vitamin B6-status. 8 , 10

    Det er kjent at individer med Cbl-mangel kan uttrykke variable abnormiteter i vitamin B12-statusmarkører i plasma. Innen referanse totale Cbl- eller holoTC-konsentrasjoner sammen med forhøyede konsentrasjoner av enten plasma-MMA eller total plasma-homocystein er ikke uvanlig. 8 , 10 Dette, i kombinasjon med uspesifikke symptomer og mangel på gullstandard, gjør diagnosen Cbl-mangel spesielt utfordrende.

    👉🏼Mange studier på biokjemiske markører er utført hos voksne. 3Plasmavitamin B12-statusmarkører, og spesielt holoTC-konsentrasjoner, hos barn er imidlertid mindre godt beskrevet. Denne studien hadde som mål å studere MMA i plasma, holoTC og total Cbl hos barn og ungdom i alderen 0-18 år og å utlede aldersavhengige referanseintervaller.

    Deltakere og metoder

    Deltakere og prøver

    I denne studien inkluderte vi prøver fra barn som besøkte et lokalt primærhelsetjenestelaboratorium (CERTE, Location Martini Hospital Groningen, Nederland) for diagnostiske eller overvåkingsformål. For å forhindre inkludering av individer med åpenbar Cbl-mangel ble barn bare inkludert når hemoglobin (Hb) og gjennomsnittlig korpuskulært volum (MCV) ble bestemt og innenfor lokale referansegrenser, dvs. Hb> 6,0 mmol / L (0-5 år) og> 6,5 mmol / l (≥6 år) og MCV-verdi <120 fL (0-1 år) og <98 fL (≥1 år). Det var rettet mot å inkludere minst 160 deltakere bestående av 20 barn i hvert aldersintervall: 0-1 måned, 1-6 måneder, 6-12 måneder, 13-23 måneder, 2-4 år, 5-9 år, 10-14 år, og 15-18 år. Enkeltpersoner som en litium-heparinblodprøve var tilgjengelig for ytterligere analyser, var kvalifisert for inkludering.Den medisinske etiske komiteen ved University Medical Center Groningen bekreftet at loven om medisinsk forskning som involverer mennesker ikke gjaldt, noe som gjør offisiell godkjenning av studien unødvendig. Studieprotokollen ble utført i samsvar med Helsingforserklæringen og godkjent for frafalt samtykke da det gjaldt anonyme data og målinger i blod som var igjen materiale (rest) uten invasive prosedyrer.

    Eksempel analyser

    Før seleksjon ble Li-heparin-plasmaprøvene lagret i opptil 6 dager i kjøleskapet (4 ° C). Plasmatotal Cbl og MMA 15 and holoTC (Manual Elecsys active B12, Roche Diagnostics) are considered stable under the applied conditions. In literature, MMA concentrations are often measured in serum. Serum and Li-heparin MMA results showed no significant bias during validation procedures. After selection, samples were anonymized and stored at −80 °C until analysis. Plasma MMA concentrations were analyzed using an online Solid Phase Extraction procedure (Symbiosis, Spark Holland) combined with liquid chromatography tandem mass spectrometry (Waters Quattro Premier XE, Waters Corporation) in batches over a 6-week period. Total Cbl and holoTC concentrations were analyzed on a Cobas 6000ce analyzer (Roche Diagnostics, Almere, The Netherlands) in batches over a 4-week period. Performance characteristics of these methods are shown in Supplementary Table. Plasma creatinine was in addition measured with an enzyme assay on Cobas 6000ce, to be able to correct for abnormal kidney function.

    statistiske analyser

    Statistiske analyser ble utført ved hjelp av Excel 2010 (Microsoft), Analyze-it (Analyse-it Software, Ltd, Leeds, Storbritannia) og SPSS 23 (IBM Corporation, Chicago, IL). For ytterligere statistisk analyse ble deltakerne delt inn i 6 aldersgrupper, dvs. nyfødte (0-1 måneder), spedbarn (1-24 måneder), småbarn (1-2 år), førskolebarn (3-5 år), skole- alderen barn (6-12 år), og ungdom (13-18 år). Outliers ble identifisert og definert som verdi> 3 × interquartile range (IQR) utenfor IQR-grenser for hver aldersgruppe.

    Etter ekskludering av avvikene ble median og område bestemt for alder, og gjennomsnitt og 95% referanseintervaller (basert på 2,5 og 97,5% persentiler) ble beregnet for plasma MMA, holoTC og totale Cbl-konsentrasjoner og forholdet holoTC / totalt Cbl for hver aldersgruppe. Videre ble antall og prosentandel av barn med en unormal biomarkørkonsentrasjon beregnet ved bruk av lokale referanseintervaller for voksne, dvs. 90-340 nmol / L for MMA, 33-247 pmol / L for holoTC og 145-450 pmol / L for totalt Cbl. Korrelasjoner ble vurdert av Spearman-korrelasjoner. Kruskal - Wallis ved p  <0,05 (aldersgrupper) og post hoc Wilcoxon - Mann - Whitney U- tester (kjønn og aldersgrupper) ble brukt på testforskjeller mellom aldersgrupper. sverdier ble korrigert for multisammenligning ifølge Bonferroni; ettersom 15 sammenligninger ble utført for å teste alle aldersgrupper mot hverandre, ble p  <0,0033 ansett som signifikant. Trinnvis ble flere lineære regresjonsanalyser etter logtransformasjon av variablene anvendt for å undersøke hoveddeterminanter for MMA, holoTC og total Cbl i studiegruppen og for å korrigere forholdet mellom MMA, holoTC og total Cbl for de variable alderseffektene. Variabler inkludert i hver modell var MMA, holoTC, total Cbl, kreatinin, Hb, MCV, alder og kjønn.

    Resultater

    Studie gruppe

    Prøver på totalt 170 barn ble oppnådd, se tabell 1 . Dessverre var analyser ikke mulig for 1 (MMA), 16 (kreatinin), 18 (totalt Cbl) og 48 (holoTC) deltakere på grunn av lave prøvevolum, spesielt i nyfødte og spedbarnsprøver. I tillegg var plasmavolumene for lave til å tillate fortynning av 5 prøver med en holoTC-konsentrasjon> 150 pmol / L (1 nyfødt, 2 spedbarn og 1 smårolling) og 2 prøver med en total Cbl-konsentrasjon> 1476 pmol / L (1 spedbarn og 1 småbarn). Vi fant 10 ekstreme avvik for MMA og 3 for totalt Cbl (se figur 1 ). I tillegg fant vi 1 ekstrem outlier for holoTC / total Cbl ratio. Kjennetegn og (estimerte) referanseintervaller for Cbl-biomarkører i plasma per alderskategori er presentert i tabell 1 . Bord 1 viser også prosentandelen barn som ville hatt en unormal biomarkørkonsentrasjon ved bruk av referanseverdier for voksne. Signifikante aldersavhengige forskjeller var tydelige for MMA, holoTC og total Cbl (se tabell 1 og fig. 1 ). Forholdet mellom holoTC / total Cbl var ikke forskjellig mellom aldersgruppene (tabell 1). Nyfødte og spedbarn (gruppe 1-2) hadde signifikant forskjellig MMA i plasma sammenlignet med de andre gruppene (gruppe 3-6). For holoTC eksisterte bare signifikante forskjeller for ungdommer (6) mot småbarn, førskolebarn og barn i skolealderen (3-5) og for førskolebarn (4) mot nyfødte og skolebarn (1, 5). For totalt Cbl eksisterte det signifikante forskjeller mellom nyfødte (1) vs småbarn og førskolebarn (3, 4), spedbarn (2) vs skolebarn og ungdommer (4, 6), førskolebarn (4) vs skolebarn og ungdommer (5 , 6) og ungdom (6) mot smårollinger og barn i skolealderen (3, 5). Vesentlige forskjeller mellom aldersgrupper er også presentert i figur 1 .

    Tabell 1 Egenskaper og referanseintervaller for vitamin B12-statusmarkører i plasma per aldersgruppe.Bord i full størrelse Fig. 1: Plasmavitamin B12-statusmarkører i seks aldersgrupper.

    Box og whiskers plots av plasma MMA, holoTC og total Cbl av seks aldersgrupper, se tabell 1(hovedtekst). Outliers, definert som verdi> 3 × interkvartilområde (IQR) utenfor IQR-grenser, er avbildet med en stjerne. Aldersgrupper med signifikante biomarkørkonsentrasjonsforskjeller ( p  <0,0033, korrigert for Bonferroni) er forbundet med linjer.

    Full størrelse bilde

    Korrelasjon og (multivariable) regresjonsanalyser

    PlasmamMA var signifikant relatert til alder, kreatinin, MCV, holoTC og total Cbl, men ikke til Hb og sex (tabell 2 ). En tilstrekkelig multivariabel lineær regresjonsmodell kunne bare oppnås etter fjerning av ekstreme avvik for MMA. Plasma MMA forble signifikant relatert til alder (standardisert Beta = -0,47, p  <0,0005) og total Cbl (St. Beta = -0,23, p  = 0,005). Disse variablene forklarte 30% av den totale variasjonen i MMA-konsentrasjoner i plasma ( n  = 110). HoloTC var signifikant korrelert med alder, kreatinin, MCV, MMA og total Cbl, men ikke med Hb og kjønn (Tabell 2 ). Bare total Cbl forble signifikant relatert til holoTC i multivariabel lineær regresjonsanalyse (St Beta = 0,65, p <0,0005), forklarer 43% av den totale variasjonen i plasma totale Cbl-konsentrasjoner ( n  = 116). Totale Cbl-konsentrasjoner var signifikant relatert til kreatinin, Hb, MCV, MMA og holoTC, men ikke til alder og kjønn (tabell 2 ). Bare holoTC (St Beta = 0,55, p  <0,0005) og MCV (St Beta = -0,31, p  <0,0005) forble signifikant relatert til total Cbl i multippel lineær regresjonsanalyse, forklarer 51% av den totale variasjonen i totale Cbl-konsentrasjoner ( n  = 116). Forholdet mellom plasma B12-markører og alder er presentert i figur 2. Den beste tilpasningen ble oppnådd etter loggtransformasjon av variablene. De forskjellige forholdene mellom plasma total Cbl, plasma holoTC og plasma MMA er presentert i supplerende figur 1 .

    Tabell 2 Spearman korrelasjonsmatrise.Bord i full størrelse Fig. 2: Forholdet mellom (log-skalert) vitamin B12-statusmarkører i plasma og alder.

    Konsentrasjoner av plasma MMA ( a ), holoTC ( b ) og total Cbl ( c ) ble log-transformert for å produsere 95% referansekurver. Vektene ble loggtransformert, men for klarering blir konsentrasjoner notert som ikke-transformerte konsentrasjoner. Log plasma MMA ble best beskrevet ved hjelp av en kraft utstyrt linje ( R 2  = 0,189, p  <0,0001), log plasma holoTC ( R 2  = 0,245, p  <0,0001), og log total Cbl ( R 2  = 0,330, p  <0,0001) ) ble best beskrevet ved hjelp av polynomiske (kvartiske) monterte linjer.

    Full størrelse bilde

    Diskusjon

    Denne studien undersøkte plasma MMA, holoTC og totale Cbl-konsentrasjoner hos barn i alderen 0-18 år som besøkte et primærhelsetjenestelaboratorium, og aldersavhengige referanseintervaller ble avledet derav. Alle vitamin B12-statusmarkører var signifikant relatert til alder. PlasmamMA var høyest hos små barn, spesielt mellom 1 og 6 måneder, mens både total Cbl og holoTC var høyest fra omtrent 6 måneder til 4 år og hadde en tendens til å reduseres litt til 10 år. Plasma-holoTC ble korrelert med totalt plasma Cbl; forholdet var uavhengig av alder. I vår populasjon var plasma MMA litt mer signifikant relatert til total Cbl enn til holoTC.

    I vår studiepopulasjon på 170 barn, målte vi tre vanlige Cbl-statusmarkører, inkludert plasma holoTC. Å gjenkjenne Cbl-mangel er viktig, da det hos små barn kan være forbundet med irritabilitet, hypotoni, utviklingsforsinkelse, svikt i å trives, tretthet og motoriske forstyrrelser. 4, 5 , 6 , 7 Symptomer kan forbedres etter Cbl-tilskudd 4 , 16, men kan forbli i lange perioder når Cbl-mangel ikke gjenkjennes. 7Anerkjennelse av forhøyet MMA er også viktig for identifisering av genetiske MMA acidurias, inkludert medfødte feil i Cbl metabolisme og transport.

     Tidlig behandling er obligatorisk for de fleste av disse lidelsene for å forhindre alvorlig og permanent nevrologisk skade og nyresvikt. 17 Cbl-statusmarkører og spesialiserte metabolske og genetiske tester er ofte nødvendige for å nå en endelig diagnose, som gjennomgått av Hannibal et al. 3 I noen land er visse mangler inkludert i det nasjonale neonatale screeningprogrammet, men screening kan kompliseres av falske positive resultater på grunn av lav Cbl-status, noe som krever referanseintervaller for Cbl-status biomarkører. 3Det store antallet barn med unormale metabolittkonsentrasjoner når de bruker voksne referanseverdier, som vist i tabell 1 , illustrerer ytterligere behovet for veletablerte referanseintervaller hos barn.

    I vår studie var MMA i plasma spesielt høyt hos barn i alderen 1-6 måneder og holdt seg relativt stabilt etter det første året, noe som er i tråd med resultatene fra tidligere studier. 2 , 12, 13 , 18 , 19 Faktisk hadde 30% av barna rundt 4 måneders MMA-nivå> 1000 nmol / L. Høyere MMA-konsentrasjoner hos små barn sammenlignet med andre aldersgrupper ser ut til å være spesielt avhengige av mors ernæringsfaktorer under graviditet og amming. 12 ,19 

    Barn som bare ammes har signifikant lavere Cbl-status, dvs. høyere plasma-MMA og lavere total Cbl, sammenlignet med barn med som også får annen føde, 4 , 16spesielt, men ikke utelukkende, når mødrene deres spiser et makrobiotisk kosthold. 20 Det bemerkes at 10 individer ble identifisert med stort sett forhøyede MMA-konsentrasjoner. Årsaken til dette kunne bare spekuleres ettersom prøvene ikke var sporbare til emnet og ikke kunne undersøkes nærmere. Minst ett individ kan ha hatt Cbl-mangel, da plasmasummen Cbl og holoTC også var lave. Andre årsaker kan omfatte en forhøyet syntese fra propionsyre produsert av den anaerobe tarmfloraen, umodenhet i nyrene, misbruk av lystgass (rekreasjon) (men ikke sannsynlig i veldig ung alder), sporadiske (heterozygote) mutasjoner i gener som koder for 3-hydroksy-isobutyryl-CoA hydrolase- og acyl-CoA-syntetase-familiemedlem 3, 21 eller medfødte feil i MMA- eller Cbl-metabolisme. 3Uforklarlig forbigående eller vedvarende høy MMA, uten bevis for Cbl-insuffisiens eller annen åpenbar årsak, er et fenomen som oftere blir funnet, og understreker ytterligere vanskeligheter med å diagnostisere Cbl-mangel. 10 Hos små barn er det trolig enda vanskeligere å diagnostisere Cbl-mangel, siden MMA i plasma har en annen sammenheng med alderen sammenlignet med de to andre vitamin B12-plasmamarkørene i plasma (fig. 1 og 2 ).

    Data om plasma-holoTC-konsentrasjoner hos små barn er knappe. I vår studie var holoTC sterkt korrelert med plasma totalt Cbl. Både total Cbl og holoTC var høyest fra 6 måneder til 4 år og hadde en tendens til å reduseres deretter til 10 år. Bailey et al. 22 beskrev et noe lignende mønster med høyeste konsentrasjoner hos barn i alderen 1-9 år. Konsentrasjonene ble redusert opp til 14 år for å holde seg stabile etterpå. 22 HoloTC-konsentrasjoner var lik de som ble funnet av andre i 9-månedersalderen 13 og 9- og 17-årsalderen. 23Andre fant imidlertid at holoTC gikk ned i de første 4-6 månedene fra 90 pmol / l hos nyfødte til 36 pmol / l hos ammede og 75 pmol / l hos ikke-ammede barn i en studie 12 og fra 201 pmol / l hos nyfødte til 60 pmol / l hos ammede barn i en annen studie. 13 Totale Cbl-konsentrasjoner ble også redusert i morsmelk etter 4 måneder, 13 som antyder (subklinisk) Cbl-mangel, spesielt hos ammende barn. Til tross for at de fleste studier viste en positiv effekt av amming utelukkende på spedbarnets utvikling, 24 ble det tidligere funnet at utelukkende ammede spedbarn med lav fødselsvekt har lavere Cbl-status og dårligere bruttomotorisk utvikling enn spedbarn med lav fødselsvekt . 4

     Hos barn med biokjemisk Cbl-mangel forbedret motorisk motorisk funksjon seg betydelig etter Cbl-behandling. 4 Dessverre, i vår kohort, var antall prøver hos barn opptil 6 måneder begrenset, spesielt i de svært unge aldersgruppene. Imidlertid virket plasma holoTC høyere mellom 1 og 6 måneder sammenlignet med disse tidligere studiene, noe som antydet at en lavere andel av de inkluderte barna hadde subklinisk Cbl-mangel. De høyere konsentrasjonene av totalt Cbl og holoTC mellom 6 måneder og 9 år kan være et resultat av høyere Cbl-forbruk etter innføring av kjøtt. Videre kan en økning i konsentrasjoner av transportproteinene i disse aldre spesielt bidra til økningen i total Cbl som Greibe et al. 1. 3viste at HC-konsentrasjonene økte fra 4 til 9 måneders alder. Konsentrasjoner av transportproteinene er ikke godt beskrevet hos barn og kunne dessverre ikke studeres i vår kohort. Av interesse, i studien av Greibe et al., Var 13 plasma MMA relatert til plasma totalt Cbl, men ikke til plasma holoTC til alle tidspunkter. I vår studie viste regresjonsanalyser også en mer signifikant sammenheng mellom total Cbl og MMA sammenlignet med holoTC, noe som tyder på at total Cbl reflekterer bedre subklinisk Cbl-mangel hos barn enn holoTC. Forskjellen var imidlertid liten, og dens mulige merverdi må undersøkes nærmere. Plasma holoTC ser ut til å være en mer lovende markør hos voksne; verdien av begge markørene diskuteres imidlertid ettersom mange confounders er identifisert eller fortsatt ukjente.3 , 9

    Den første begrensningen i studien er det relativt lave antallet barn, spesielt i de laveste aldersgruppene. Dette ugyldiggjør nøyaktigheten av de estimerte referanseverdiene. Ytterligere validering i en større kohort anbefales derfor sterkt. Men totalt 170 barn var inkludert, kunne vi studere sammenhengen mellom markørene og alderen, noe som fremhevet viktigheten av å anvende aldersspesifikke referanseverdier. Videre estimerte vi referanseintervaller fra barn som besøkte et primærhelsetjenestelaboratorium av ukjente årsaker. I pediatri, hovedsakelig på grunn av praktiske og etiske grunner, er det imidlertid ikke uvanlig å estimere referanseintervaller fra barn som besøker et primærhelsetjenestelaboratorium. 25Videre forhindrer ekskludering av avvikere før bestemmelse av 95% referanseintervaller til en viss grad inkludering av barn med komorbiditeter som påvirker disse biomarkørene, inkludert betennelse eller kreft, som kan forårsake totale Cbl-forhøyelser. 11Dessverre målte ikke studien konsentrasjoner av totalt plasma-homocystein og av Cbl-transportproteiner, dvs. HC og TC, som kunne ha hjulpet til tolkningen av total Cbl og holoTC. Den begrensede mengden blod som var tilgjengelig, tillot oss heller ikke å måle folatstatus. Folat er kjent for å maskere de hematologiske symptomene på Cbl-mangel. Videre er det også bekymringer for at forhøyede folatkonsentrasjoner kan forverre vitamin B12-status og øke MMA-konsentrasjonen. Mekanismen er ikke kjent, men det er blitt antatt at folat inaktiverer vitamin B12 ved irreversibel oksidasjon. 26 Selv om alle inkluderte barn hadde normal Hb og MCV, kan ikke (sub) klinisk Cbl-mangel utelukkes når hematologiske parametere er innenfor referansegrenser. 1 ,8 Videre kan det hevdes at det er tvilsomt å bruke 95% referanseintervaller for ernæringsmarkører på grunn av forvirrende til og med i sunne populasjoner. Dessverre er det ingen gullstandard for Cbl-status, 9noe som gjør det spesielt vanskelig å bestemme referansepopulasjonen og å etablere grenseverdier for optimal vitamin B12-status. Ikke desto mindre, siden plasmakoncentrasjoner av Cbl-biomarkører i studien ikke i det vesentlige skilte seg fra de som ble rapportert av andre som studerte en av parameterne hos tilsynelatende friske barn, kan de foreslåtte referanseintervallene betraktes som et godt utgangspunkt for videre studier om dette emnet. Dessuten kan disse intervallene brukes for å forenkle diagnosen klinisk Cbl-mangel hos barn, forutsatt ingen signifikante forstyrrelser mellom laboratoriemetoder som brukes.

    Avslutningsvis studerte vi Cbl-biomarkører og estimerte aldersavhengige referanseintervaller for MMA i plasma, holoTC og total Cbl for barn i alderen 0-18 år. Dette kan bidra til å gjenkjenne og overvåke barn mistenkt for Cbl-mangel.

    Referanser

    1. 1.

      Hunt, A., Harrington, D. & Robinson, S. Vitamin B12-mangel. BMJ 349 , 1-10 (2014).

      Artikkel Google Scholar

    2. 2.

      Hogeveen, M. et al. Metylmalonsyreverdier hos sunne nederlandske barn. Eur. J. Nutr. 47 , 26-31 (2008).

      CAS Artikkel Google Scholar

    3. 3.

      Hannibal, L. et al. Biomarkører og algoritmer for diagnostisering av vitamin B12-mangel. Front. Mol. Biosci . 3 , 27 (2016).

    4. 4.

      Torsvik, IK, Ueland, PM, Markestad, T., Midttun, Ø. & Monsen, ALB Motorisk utvikling relatert til varigheten av eksklusiv amming, B-vitaminstatus og B12-tilskudd hos spedbarn med en fødselsvekt mellom 2000-3000 g, resultater fra randomiserte intervensjonsforsøk. BMC Pediatr. 15 , 1-11 (2015).

      Artikkel Google Scholar

    5. 5.

      Graham, SM, Arvela, OM & Wise, GA Langvarige nevrologiske konsekvenser av ernæringsmessig vitamin B12-mangel hos spedbarn. J. Pediatr. 121 , 710-714 (1992).

      CAS Artikkel Google Scholar

    6. 6.

      Bicakci, Z. Veksthemming, generell hypotoni og tap av ervervede nevromotoriske ferdigheter hos spedbarn til mødre med cobalaminmangel og den mulige rollen som succinyl-CoA og glycin i patogenesen. Medisin 94 , e584 (2015).

      CAS Artikkel Google Scholar

    7. 7.

      Dror, DK & Allen, LH Effekt av vitamin B12-mangel på nevroutvikling hos spedbarn: nåværende kunnskap og mulige mekanismer. Nutr. Åp 66 , 250-255 (2008).

      Artikkel Google Scholar

    8. 8.

      Stabler, SP-vitamin B12-mangel. N. Engl. J. Med. 368 , 149-160 (2013).

      CAS Artikkel Google Scholar

    9. 9.

      Carmel, R. Diagnosis and management of clinical and subclinical cobalamin deficiencies: why controversies persist in the age of sensitive metabolic testing. Biochimie 95, 1047-1055 (2013).

      CAS Article Google Scholar

    10. 10.

      Wolffenbuttel, B. H. R., Wouters, H. J. C. M., Heiner-Fokkema, M. R. & van der Klauw, M. M. The many faces of cobalamin (vitamin B12) deficiency. Mayo Clin. Proc. Innov. Qual. Outcomes 3, 200-214 (2019).

      Article Google Scholar

    11. 11.

      Arendt, J. F. B. & Nexo, E. Unexpected high plasma cobalamin. Clin. Chem. Lab. Med. 51, 489-496 (2013).

      CAS Article Google Scholar

    12. 12.

      Hay, G. et al. Maternal folate and cobalamin status predicts vitamin status in newborns and 6-month-old infants. J. Nutr. 140, 557-564 (2010).

      CAS Article Google Scholar

    13. 13.

      Greibe, E. et al. Cobalamin and haptocorrin in human milk and cobalamin-related variables in mother and child: a 9-mo longitudinal study. Am. J. Clin. Nutr. 4, 389-395 (2013).

      Article Google Scholar

    14. 14.

      Ok Bozkaya, I., Yarali, N., Kizilgün, M., Ozkan, S. & Tunc, B. Relationship between the levels of holotranscobalamin and vitamin B12 in children. Indian J. Hematol. Blood Transfus. 33, 537-540 (2017).

      Article Google Scholar

    15. 15.

      Hustad, S. et al. Kinetic modeling of storage effects on biomarkers related to B vitamin status and one-carbon metabolism. Clin. Chem. 58, 402-410 (2012).

      CAS Article Google Scholar

    16. 16.

      Torsvik, I., Ueland, P. M., Markestad, T. & Bjørke Monsen, A. L. B. Cobalamin supplementation improves motor development and regurgitations in infants: results from a randomized intervention study. Am. J. Clin. Nutr. 98, 1233-1240 (2013).

      CAS Article Google Scholar

    17. 17.

      Baumgartner, M. R. et al. Proposed guidelines for the diagnosis and management of methylmalonic and propionic acidemia. Orphanet J. Rare Dis. 9, 1-36 (2014).

      Article Google Scholar

    18. 18.

      Ueland, P. M. & Bjørke Monsen, A. L. B. Hyperhomocysteinemia and B-vitamin deficiencies in infants and children. Clin. Chem. Lab. Med. 41, 1418-1426 (2003).

      CAS Article Google Scholar

    19. 19.

      Monsen, A. L. B., Refsum, H., Markestad, T. & Ueland, P. M. Cobalamin status and its biochemical markers methylmalonic acid and homocysteine in different age groups from 4 days to 19 years. Clin. Chem. 49, 2067-2075 (2003).

      CAS Article Google Scholar

    20. 20.

      Bjørke Monsen, A. L. B. & Ueland, P. M. Homocysteine and methylmalonic acid in diagnosis and risk assessment from infancy to adolescence. Am. J. Clin. Nutr. 78, 7-21 (2003).

      Article Google Scholar

    21. 21.

      Molloy, A. M. et al. A common polymorphism in HIBCH influences methylmalonic acid concentrations in blood independently of cobalamin. Am. J. Hum. Genet. 98, 869-882 (2016).

      CAS Article Google Scholar

    22. 22.

      Bailey, D. et al. Marked biological variance in endocrine and biochemical markers in childhood: establishment of pediatric reference intervals using healthy community children from the CALIPER cohort. Clin. Chem. 59, 1393-1403 (2013).

      CAS Article Google Scholar

    23. 23.

      Caldeira-Araújo, H. et al. Homocysteine metabolism in children and adolescents: influence of age on plasma biomarkers and correspondent genotype interactions. Nutrients. 11, 646 (2019).

    24. 24.

      Kramer, M. S. & Kakuma, R. Optimal duration of exclusive breastfeeding. Cochrane Database Syst. Rev. 8, CD003517 (2012).

    25. 25.

      Shaw, J. L. V., Binesh Marvasti, T., Colantonio, D. & Adeli, K. Pediatric reference intervals: challenges and recent initiatives. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 50, 37-50 (2013).

      Article Google Scholar

    26. 26.

      Miller, J. W., Garrod, M. G., Allen, L. H., Haan, M. N. & Green, R. Metabolic evidence of vitamin B-12 deficiency, including high homocysteine and methylmalonic acid and low holotranscobalamin, is more pronounced in older adults with elevated plasma folate. Am. J. Clin. Nutr. 90, 1586-1592 (2009).

      Link